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ELISA的检测目的是为了实验提供准确的实验依据,为了保证实验数据的可靠性,在实验过程中必须坚持全面的质量控制和全过程质量控制,在收集标本前都必须有一个完整的计划。
ELISA标本的处理:
1、血清:室温血液私人凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,如有沉淀形成,应再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成分时,用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)仔细收集上清,检测细胞内的成分时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右,通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成分。
5.组织标本:切割标本后,称取重量,加入一定量的PBS,PH7.4,用液氮迅速冷冻保存备用,标本融化后任然保持2-8°C的温度,加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,分装后一份待检测,其余冷冻备用,
6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行试验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20°C保存,单应避免反复冻融。
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