山东省德州市二级生物安全柜 检测项目--安衡检测 

 为了保障生物安全柜的安全性，应定期对安全柜进行维护和保养：1、每次使用前后应对安全柜工作区进行清洁和消毒。2、HEPA过滤器的使用寿命到期后，应由接受过生物安全柜专门培训的*人员更换。3、WHO颁布的实验室生物安全手册、美国生物安全柜标准NSF49和食品药品管理局生物安全柜标准YY0569都要求有下列情况者，应对生物安全柜进行安全检测：安装完毕投入使用前；一年一度的常规检测；当安全柜移位后；更换HEPA过滤器和内部部件维修后。

二级生物安全柜   生物安全柜检测主要包括物理学检测和生物学检测两个方面，根据检测性质可分为*检测、后续检测。除生物安全柜的一年一度的常规检测外，下列情况时，如安装后、移动后、检修后、更换过滤器后，也必须进行现场生物安全柜检测。

生物安全柜的分级标准：Ⅰ级生物安全柜；Ⅰ级生物安全柜从前窗开口区向内吸入的负压气流用以保护人员的安全，排出气流经HEPA过滤器过滤排出以保护环境。Ⅰ级生物安全柜特点如下：①工作空间前开口处有定向的流入的气流，流速0.7~1.0m/s;②在负压状态下工作;③出风经过HEPA过滤器过滤，可向实验室内排出。Ⅱ级生物安全柜；Ⅱ级生物安全柜从前窗开口区向内吸入具有一定速度的气流，保护操作者;垂直的、无颗粒的层流气体保护工作区内的样品不会受到交叉感染;排出气体经HEPA过滤器过滤以保护环境。Ⅱ级生物安全柜细分为A1、A2、B1、B2型。Ⅱ级生物安全柜特点如下：①工作空间前开口处有定向的流入的气流;②经HEPA过滤器过滤后，有向下层流气流;③在负压状态下工作;④出风经过HEPA过滤器过滤排出。Ⅲ级生物安全柜；Ⅲ级生物安全柜具有全封闭、不泄露的结构，操作者必须通过手套进行操作。Ⅲ级生物安全柜特点如下：①无气流流入口，当去掉单只手套后手套连接口的气流流速不低于0.7m/s;②至少在120Pa的负压下工作;③出风需经过双HEPA过滤器或经过一道HEPA过滤器过滤再经焚烧处理，可向实验室内排风。

二级生物安全柜   人员、产品与交叉污染保护：(1)人员保护；人员保护有2种检测方法：微生物法和碘化钾法。微生物法需制备枯草芽孢、杆菌芽孢，测试后要经过细菌培养，操作复杂，用时较长，不便于外出开展检测。碘化钾法是定义在EN12469上的，测试方法与微生物法相同，用碘化钾代替了细菌，可当场验证生物安全柜污染控制性能，操作性强，用时较短。(2)产品保护；在生物安全柜的工作台面上排满敞开的琼脂培养皿;圆筒固定在台面上的ZX区，一端贴住工作区的后壁，另一端从前窗操作口伸出生物安全柜至少150mm，圆筒的轴线高于台面70mm;盛有5×106/mL~8×106/mL的芽孢悬浮液的喷雾器放在柜外，喷雾器喷射轴在生物安全柜ZX并与操作口上沿平齐。喷雾器的喷嘴前端位于操作口外100m，喷雾方向平行于台面，正对操作口;一个阳性对照琼脂培养皿放在圆筒下;启动喷雾器，运行5min。喷雾器关闭5min后盖上琼脂培养皿的盖子;将培养皿在37.0℃培养。培养到24~28h时检查计数，如果呈阴性，继续培养至培养时间达44~48h时检查计数。Ⅱ级生物安全柜用枯草芽孢杆菌芽孢进行试验，菌落数应不过5CFU/次，对照皿应阳性。(3)交叉污染保护；将盛有5×104/mL~8×104/mL的芽孢悬浮液的喷雾器置于生物安全柜内，紧靠左侧内壁的ZX，喷雾器喷射轴线在工作台面上76~30mm处，喷射方向平行于台面，正对对面的侧壁;两排对照培养皿位于喷嘴下方，距喷雾器所在侧壁360mm处放一排培养皿，距喷雾器所在侧壁360mm外放一排培养皿。启动喷雾器，运行5min。15min后盖上培养皿，37.0℃培养。将喷雾器放于靠右侧内壁ZY重复测量。培养基培养到24~28h时检查计数，如果呈阴性，继续培养至培养时间达44~48h时检查计数。Ⅱ级生物安全柜用枯草芽孢、杆菌芽孢进行实验，菌落数应不过2CFU/次。

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生物安全一级（BSL-1）：适合用于非常熟悉的病源，该病源不会经常引发健康成人疾病，对实验人员和环境潜在危险小，实验室没有必要和建筑物中的一般行走区分开，一般按照标准的分级生物操作在开放的实验室台面上开展工作。不要求一般也不使用特殊的抑制设备和设施（生物安全柜）。