Annexin V-kFluor594细胞凋亡检测试剂盒(荧光显微镜专...

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型号
BJ-01X6366

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邦景

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暂无

更新时间
2023-05-26 09:56:42

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    中文名称:Annexin V-kFluor594细胞凋亡检测试剂盒(荧光显微镜)

    英文名称:Annexin V-keyFlour594 Apoptosis Detection Kit

    产品规格:10T|20T|50T|100T

    发货周期:1~3天

    注意事项:

     

    在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标。将Annexin V 进行荧光素kFluor594 标记,以标记了的Annexin V 作为荧光探针,利用荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。

    本试剂盒可用于悬浮细胞以及贴壁培养的细胞,不适用于组织。

    操作规程

    1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

    2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

    3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及*湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

    4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

    5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

    6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

    7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

    8、结果分析

    a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

    b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

    公司细胞现货供应,质量有保证、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供*价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

    产品名称

    英文名称

    规格

    货号

    Annexin V-kFluor594细胞凋亡检测试剂盒(荧光显微镜)

    Annexin V-keyFlour594 Apoptosis Detection Kit

    10T|20T|50T|100T

    BJ-01X6366

    细胞培养方法:

    1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

    ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

    ②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

    ③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

    ④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

    ⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

    ⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。


    2、细胞复苏:

    ①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

    ②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

    3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

    ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

    ②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

    ③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

    ④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

    62687-22-3野菊花内酯 规格: HPLC≥98%;10mg

    15085-71-9小芸木素 规格: HPLC≥98%;10mg

    550-24-3酸藤子酚 规格: HPLC≥98%;20mg

    67400-17-3(S型)人参皂苷Rh2 规格: HPLC≥98%;20mg

    2673-40-7派利文碱 规格: HPLC≥98%;20mg

    490-79-9龙胆酸 规格: HPLC≥98%;20mg

     规格: HPLC≥98%;0.2ml

    25712-94-1高熊果酚苷 规格: HPLC≥98%;10mg

    3,6-O-二啡酰奎宁酸 规格: HPLC≥98%;20mg

    60132-35-6臭灵丹二醇 规格: HPLC≥98%;20mg

    83905-01-5阿奇 规格: HPLC≥98%;100mg

    白头翁皂苷E-1 规格: HPLC≥98%;10mg

    Annexin V-kFluor594细胞凋亡检测试剂盒(荧光显微镜)电镜脱钙液  100ml|500ml

    脱钙后碱处理液  500ml

    抗酒石酸酸性磷酸酶染色液  3×10ml|3×20ml

    酸性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)  3×10ml|3×20ml

    β-半乳糖苷酶染色试剂盒(细胞)  100T

    β-半乳糖苷酶染色试剂盒(组织)  100T

    细胞色素氧化酶染色液(对苯二铵法)  4×50ml

    脱钙终点检测试剂盒(化学法)  100T

    蔗糖-PBS溶液(5%)  500ml

    甲酸水溶液(10%)  500ml

    蔗糖-PBS溶液(10%)  500ml

     

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