一、细胞培养的基本概念

    体外培养（in vitro culture）包括所有结构层次的培养，即：组织培养（tissue culture）、细胞培养（cell culture）和器官培养（organ culture）。

细胞培养(Cell culture)指从生物机体取出部分组织分散成单个细胞或直接从机体取出单个细胞，也可把体外培养细胞分散成单个细胞在体外条件下培养，细胞能继续存活与增殖。

二、细胞培养目的与用途

1、科学研究

（1）药物研究开发，如新药筛选，疫苗、基因工程药物、细胞工程药物研究与开发、单克隆抗体制备等。

（2）基础研究，如药物作用机理、基因功能、疾病发生机理等研究。

2、生物制药

（1）疫苗生产：如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)，多肽疫苗（肿瘤疫苗)等。

（2）基因工程药物生产：如EPO等。

（3）抗体药物、基因治疗药物生产。

（4）细胞工程药物生产：生物细胞内的一些生物活性多肽，生物活性物质等。

（5）利用细胞法体外测定生物活性物质的活性；并预测其在体内的药效和替代体内法检测其成品的生物活性。

三、原代培养和传代培养

      原代培养（primary culture）:将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。

但实际上，通常把第yi代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。

传代培养（subculture）：细胞在培养器皿中生长一定时间后，被分开接种到新的培养器皿中。

    当原代培养*以后，随着培养时间的延长和细胞不断分裂，一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制，生长速度减慢甚至停止；另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。此时就需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养。

对单层培养而言，80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段。

四、体外培养细胞的方式

     群体培养（mass culture），将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中，让细胞贴壁生长，汇合（confluence）后形成均匀的单细胞层；

克隆培养（clonal culture），将高度稀释的游离细胞悬液加入培养瓶中，各个细胞贴壁后，彼此距离较远，经过生长增殖每一个细胞形成一个细胞集落，称为克隆（clone）。一个细胞克隆中的所有细胞均来源于同一个祖先细胞。