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采用HILIC色谱柱TSKgel Amide-80测定甜菜碱的含量
甜菜碱(Betaine)是一种生物碱,天然存在于很多动植物体内。其分子内有3个有效甲基,作为甲基提供者参与合成蛋氨酸,在营养物质的代谢中起着十分重要的作用。甜菜碱在医药、化妆品、食品发酵和饲料工业等多个行业中都有广泛的应用。
溶液配制
样品稀释液:75% 乙腈-水溶液。
用样品稀释液将甜菜碱储备液 (2 mg/mL) 序列稀释得到浓度为0 μg/mL,20 μg/mL,50 μg/mL,100 μg/mL,200 μg/mL,500 μg/mL,1000 μg/mL,2000 μg/mL的标准工作液,依次由低到高进样检测。
分析条件
色谱柱:TSKgel Amide-80 (3μm, 4.6mmI.D. ×15cm)
流动相:乙腈-水,梯度洗脱
流速:1.0 mL/min
柱温:30℃
紫外检测器:205 nm
进样量:10 μL
流动相梯度洗脱程序见下表:
时间 (min) |
水 (%) |
乙腈 (%) |
0 |
5 |
95 |
2 |
10 |
90 |
3 |
30 |
70 |
4~9 |
50 |
50 |
10~15 |
5 |
95 |
分析结果
图2. 甜菜碱标准曲线(标准方差=0.99997)
本应用参照行业标准NY/T 2947-2016,按高效液相色谱法,采用亲水作用多孔硅胶色谱柱TSKgel Amide-80 (3 μm, 4.6 mm I.D. × 15 cm) 来测定甜菜碱的含量。分析结果表明,该色谱柱完全满足标准中对甜菜碱分离检测的要求。
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