培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
产品属性:
中文名称:K-252B(蛋白激酶仰制剂) ,生化试剂
英文名称:K-252B
产品规格:1mg
发货周期:1~3天
CAS号:99570-78-2
MDL号:MFCD00132117
EINECS号:999-999-2
分子量:453.45
储存条件:冷冻(-20℃)
我们科研实验室: 实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,*将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞*;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,*在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
3-炳基十四基二甜菜碱 质量规格:>98.0%,BR Myristyl sulfobetaine 杆菌属 Lactobacillus sp.豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
莫地平杂质Ⅰ 订购|咨询 规格: 50mg 10号染色体开放阅读框93抗体 TRACP ELISA Kit 人抗酒石性酶(TRACP)ELISA试剂盒
4'-酰并-18-冠-6-(>98.0%(GC)) 质量规格:>98.0%(GC) 4'-Formylbenzo-18-crown 6-Ether FRhK-4(恒河猴胚肾细胞)5×106cells/瓶×2
重楼皂苷 VⅡ 英文名称:Paris polyphylla saponin V II 保存:-20℃ 规格:10mg 前列腺素E2抗体
敌草隆(标准品) 质量规格:分析标准品,99.5% Diuron 粘蛋白20(MUC20)重组蛋白英文名称:Recombinant Mucin 20 (MUC20)
蒿 订购|咨询 规格: 20mg ATP6V1B2蛋白抗体 SHH ELISA Kit 音猬因子(SHH)ELISA试剂盒
吗氯贝胺 质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养 Moclobemide 胞外5'-核苷酶(NT5E)重组蛋白英文名称:Recombinant 5'-Nucleotidase, Ecto (NT5E)
9-氧基喜树碱 订购|咨询 规格: HPLC≥98%;20mg 人毛细血管扩张性共济失调突变基因(ATM)ELISA试剂盒人96T6.25-400 nmol/L小鼠碳酐酶1(CA-1)ELISA试剂盒,英文名:CA-1 ELISA Kit
刺玫果 英文名称:Rosa davurica 保存:-20℃ 规格:1g DNA修复蛋白NBS1抗体
菝葜皂苷元;Sarsasapogenin 订购|咨询 规格: 20mg ELISA Kit for Human Platelet-derived growth factor D大鼠表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒,英文名:EGF ELISA Kit
柚皮苷二查尔 质量规格:HPLC≥98%,标准品 Naringin dihydrochalcone 人非小细胞肺细胞英文名称:NCI-H1299
1,6,20,25-四氮杂[6.1.6.1]对环芳(>98.0%(HPLC)) 质量规格:>98.0%(HPLC) 1,6,20,25-Tetraaza[6.1.6.1]paracyclophane QBC-939, 人胆管细胞
苏丹红G/溶剂红1/油红113 质量规格:BS Sudan red G/Solvent Red 1 胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)重组蛋白英文名称:Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3)
K-252B(蛋白激酶仰制剂) ,生化试剂Paxillin 桩蛋白Paxillin抗体 规格: 0.1mlCECR6 猫眼综合征染色体候选基因6抗体 规格: 0.2ml 莱苞迪甙C(标准品) Rebaudioside C
S100A4 S100A4抗体 规格: 0.1ml 鸢尾多糖 Roof Iris Rhizome polysaccharose
TBX2/T-box2 栓素B2抗体(一种新发现的抑基因) 规格: 0.2ml 半胱胺盐盐 Cysteamine Hydrochloride
Mouse Anti-rat IgG/Cy3 Cy3标记的小鼠抗大鼠IgG 规格: 0.1ml 3-基喃 3-Methylfuran (stabilized with HQ)
L-Selectin/CD62L L选择素抗体 规格: 0.1ml 3-溴基-7-氧基-1,4-并恶嗪-2-(>98.0%(T)) 3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one
TMPRSS4 膜型丝氨蛋白酶2抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-dog IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的兔抗狗IgG 规格: 0.1ml 酰胺 Acetazolamide
Vesicle docking protein p115 囊泡对接蛋白p115抗体 0.2ml 1-酚 1-Naphthol
FAM123B/AMER1/Wilms tumor on the X 母细胞瘤基因X染色体蛋白抗体 规格: 0.2ml 4-基-6,7-亚基二氧代香豆素(>99.0 %(GC)) 4-Methyl-6,7-methylenedioxycoumarin
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培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
产品属性:
中文名称:K-252B(蛋白激酶仰制剂) ,生化试剂
英文名称:K-252B
产品规格:1mg
发货周期:1~3天
CAS号:99570-78-2
MDL号:MFCD00132117
EINECS号:999-999-2
分子量:453.45
储存条件:冷冻(-20℃)
我们科研实验室:
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,*将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞*;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,*在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
3-炳基十四基二甜菜碱 质量规格:>98.0%,BR Myristyl sulfobetaine 杆菌属 Lactobacillus sp.豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
莫地平杂质Ⅰ 订购|咨询 规格: 50mg 10号染色体开放阅读框93抗体 TRACP ELISA Kit 人抗酒石性酶(TRACP)ELISA试剂盒
4'-酰并-18-冠-6-(>98.0%(GC)) 质量规格:>98.0%(GC) 4'-Formylbenzo-18-crown 6-Ether FRhK-4(恒河猴胚肾细胞)5×106cells/瓶×2
重楼皂苷 VⅡ 英文名称:Paris polyphylla saponin V II 保存:-20℃ 规格:10mg 前列腺素E2抗体
敌草隆(标准品) 质量规格:分析标准品,99.5% Diuron 粘蛋白20(MUC20)重组蛋白英文名称:Recombinant Mucin 20 (MUC20)
蒿 订购|咨询 规格: 20mg ATP6V1B2蛋白抗体 SHH ELISA Kit 音猬因子(SHH)ELISA试剂盒
吗氯贝胺 质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养 Moclobemide 胞外5'-核苷酶(NT5E)重组蛋白英文名称:Recombinant 5'-Nucleotidase, Ecto (NT5E)
9-氧基喜树碱 订购|咨询 规格: HPLC≥98%;20mg 人毛细血管扩张性共济失调突变基因(ATM)ELISA试剂盒人96T6.25-400 nmol/L小鼠碳酐酶1(CA-1)ELISA试剂盒,英文名:CA-1 ELISA Kit
刺玫果 英文名称:Rosa davurica 保存:-20℃ 规格:1g DNA修复蛋白NBS1抗体
菝葜皂苷元;Sarsasapogenin 订购|咨询 规格: 20mg ELISA Kit for Human Platelet-derived growth factor D大鼠表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒,英文名:EGF ELISA Kit
柚皮苷二查尔 质量规格:HPLC≥98%,标准品 Naringin dihydrochalcone 人非小细胞肺细胞英文名称:NCI-H1299
1,6,20,25-四氮杂[6.1.6.1]对环芳(>98.0%(HPLC)) 质量规格:>98.0%(HPLC) 1,6,20,25-Tetraaza[6.1.6.1]paracyclophane QBC-939, 人胆管细胞
苏丹红G/溶剂红1/油红113 质量规格:BS Sudan red G/Solvent Red 1 胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)重组蛋白英文名称:Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3)
K-252B(蛋白激酶仰制剂) ,生化试剂Paxillin 桩蛋白Paxillin抗体 规格: 0.1mlCECR6 猫眼综合征染色体候选基因6抗体 规格: 0.2ml 莱苞迪甙C(标准品) Rebaudioside C
S100A4 S100A4抗体 规格: 0.1ml 鸢尾多糖 Roof Iris Rhizome polysaccharose
TBX2/T-box2 栓素B2抗体(一种新发现的抑基因) 规格: 0.2ml 半胱胺盐盐 Cysteamine Hydrochloride
Mouse Anti-rat IgG/Cy3 Cy3标记的小鼠抗大鼠IgG 规格: 0.1ml 3-基喃 3-Methylfuran (stabilized with HQ)
L-Selectin/CD62L L选择素抗体 规格: 0.1ml 3-溴基-7-氧基-1,4-并恶嗪-2-(>98.0%(T)) 3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one
TMPRSS4 膜型丝氨蛋白酶2抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-dog IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的兔抗狗IgG 规格: 0.1ml 酰胺 Acetazolamide
Vesicle docking protein p115 囊泡对接蛋白p115抗体 0.2ml 1-酚 1-Naphthol
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